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實驗3——直接滴定法測還原糖ppt課件

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實驗3——直接滴定法測還原糖ppt課件

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這是實驗3——直接滴定法測還原糖ppt課件下載,主要介紹了還原性糖概念;適用范圍與特點;實驗材料、儀器與試劑;實驗步驟;結果計算;注意事項,歡迎點擊下載。

還原性糖概念:還原糖是指具有還原性的糖類。在糖類中,分子中含有游離醛基和酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性。 還原糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等。非還原糖有蔗糖、淀粉、纖維素等,但它們都可以通過水解生成相應的還原性單糖。所以糖類的測定是以還原糖的測定為基礎的。 實驗三:還原糖的測定(直接滴定法) 當稱樣量為5g時,該法的檢出限為0.25g/100g (1)Cu·SO4 + 2NaOH = 2Cu(OH)2 + Na2SO4 2. 適用范圍與特點 本法又稱快速法,它是在藍-愛農容量法基礎上發展起來的,其特點是試劑用量少,操作和計算都比較簡便、快速,滴定終點明顯。適用于各類食品中還原糖的測定。但測定醬油、深色果汁等樣品時,因色素干擾,滴定終點常常模糊不清,影響準確性。本法是國家標準分析方法。 3. 實驗材料、儀器與試劑 實驗材料:蘋果 儀 器:分析天平、研缽、電爐、鐵架 臺、錐形瓶、燒杯、玻棒、容 量瓶、移液管、酸式滴定管。 試 劑: (1)堿性酒石酸銅甲液:稱取15g硫酸銅(CuSO4· 5H2O)及0.05g次甲基藍,溶于水中并稀釋至l000 mL。 (2)堿性酒石酸銅乙液:稱取50g酒石酸鉀鈉及75g氫氧化鈉,溶于水中,再加入4g亞鐵氰化鉀,完全溶解后,用水稀釋至1000mL貯存于橡膠塞玻璃瓶內。 (3)乙酸鋅溶液:稱取21.9g乙酸鋅,加3mL乙酸,加水溶解并稀釋至l00mL。 (4)10.6%亞鐵氰化鉀溶液:稱取l0.6g亞鐵氰化鉀,加水溶解并稀釋至l00mL。 (5)葡萄糖標準溶液:準確稱取l.0000g經過96±2℃干燥2h的純葡萄糖,加水溶解后加入5mL鹽酸,并以水稀釋至l000mL。此溶液每毫升相當于1.0mg葡萄糖。 4. 實驗步驟 (1)樣品處理:稱取約5.00g試樣,置于250mL容量瓶中,加50mL水,混勻,慢慢加入5 mL乙酸鋅溶液及5mL亞鐵氰化鉀溶液,加水至刻度,混勻,沉淀,靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,取續濾液備用。 (2)標定堿性酒石酸銅溶液:吸取堿性灑石酸銅甲乙液各5.0mL,置于150mL錐形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠3粒。從滴定管滴加約9mL葡萄糖標準溶液,控制在2min內加熱至沸,趁熱以每2秒l滴的速度繼續滴加葡萄糖標準溶液,直至溶液藍色剛好褪去為終點。記錄消耗葡萄糖標準液的總體積,平行操作三份,取其平均,按下式計算。 (3)試樣溶液預測:吸取5.0mL堿性灑石酸銅甲液及5.0mL乙液,置于150mL錐形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠3粒,控制在2min內加熱至沸,趁沸以先快后慢的速度,從滴定管中滴加試樣溶液,并保持溶液沸騰狀態,待溶液顏色變淺時,以每2秒1滴的速度滴定,直至溶液藍色剛好褪去為終點,記錄樣液消耗體積。 當樣液中還原糖濃度過高時應適當稀釋,再進行正式測定,使每次滴定消耗樣液的體積控制在與標定堿性酒石酸銅溶液時所消耗的還原糖標準溶液的體積相近,約在10mL左右。 當濃度過低時則采取直接加入10mL樣品液,免去加水10mL,再用還原糖標準溶液滴定至終點,記錄消耗的體積與標定時消耗的還原糖標準溶液體積之差相當于10mL樣液中所含還原糖的量。 (4)試樣溶液測定:吸取5.0mL堿性灑石酸銅甲液及5.0mL乙液,置于150mL錐形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠3粒,從滴定管中加比預測體積少lmL的試樣溶液至錐形瓶中,使在2min內加熱至沸,趁沸繼續以每2秒l滴的速度滴定,直至藍色剛好褪去為終點,記錄樣液消耗體積。同法平行操作三份,得出平均消耗體積。 5. 結果計算 6. 注意事項 (1)本方法測定的是一類具有還原性的糖,包括葡萄糖、果糖、乳糖、麥芽糖等,只是結果用葡萄糖或其他轉化糖的方式表示,所以不能誤解為還原糖=葡萄糖或其他糖,也并不完全等于各還原糖含量之和。但如果已知樣品中只含有某一種糖,如乳制品中的乳糖,則可以認為還原糖=某糖。 (2)堿性酒石酸銅甲乙液應分別存放,臨用時甲、乙液等量混合,避免析出氧化亞銅沉淀,使Cu2+有效濃度降低。 (3)本法是與定量的酒石酸銅試劑作用,Cu2+是定量的基礎,故樣品處理時,不能用銅鹽作蛋白質沉淀劑,以免引入Cu2+,得到錯誤的結果。 (4)反應終點本來應為氧化亞銅的紅色,為更易觀察,在堿性酒石酸銅乙液中加入了少量亞鐵氰化鉀,使紅色氧化亞銅與亞鐵氰化鉀生成可溶性的復鹽,反應終點由藍色變為淺黃色,即為改良的藍-愛農法。 (5)滴定時不能隨意搖動錐形瓶,更不能把錐形瓶從熱源上取下來滴定,以防止空氣進入反應溶液中。 (6)滴定必須在沸騰條件下進行,其原因一是可以加快還原糖與Cu2+的反應速度,二是次甲基藍變色反應是可逆的。還原型次甲基藍遇到空氣中氧時,又會被氧化為氧化型。此外,氧化亞銅也極不穩定,易被空氣中的氧所氧化。保持反應沸騰可防止空氣進入,避免次甲基藍和氧化亞銅被氧化而增加耗糖量。 (7)樣品溶液預測的目的:一是本法對樣品溶液中還原糖濃度有一定要求,測定時樣品溶液的消耗體積應與標定葡萄糖標準液時消耗的體積相近(10mL左右),通過預測可以了解樣品溶液濃度是否合適并加以調整。二是通過預測可知道樣液大概消耗量,以便正式滴定時,將所需體積的大部分先加入堿性酒石酸銅試劑中共沸,使其充分反應,僅留1mL左右作為滴定終點的判斷,保證1min內完成滴定,提高準確度。 (8)滴定時,對堿性酒石酸銅試劑的標定、樣品預測定、樣品測定三者的滴定條件,均應保持一定。對每一次滴定使用的錐瓶規格質量,加熱電爐功率(一般500 W),滴定速度、滴定消耗的體積均應保持一致,以減少誤差。

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